湖南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢
細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU細胞增殖檢測方法通過檢測滲入DNA復制期間的EdU,借助熒光檢測工具即可準確地檢測出新增殖的細胞,快速統計處于S期的細胞百分數,分析細胞增殖情況。該方法簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增殖檢測,尤其適用于高通量篩選試驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。EdU細胞增殖檢測試劑盒的發展趨勢如何?湖南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢
使用本試劑盒所做結果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀進行檢測,也可以用于高內涵篩選(High-Content Screening, HCS)。對6孔板培養的細胞(每孔500μl的Click反應液)、96孔板培養的細胞(每孔50μl的Click反應液)、每管細胞數量為10-100萬的流式細胞儀檢測(每管500μl的Click反應液)以及冰凍或石蠟切片的檢測(每個樣品100-200μl的Click反應液),不同規格的本產品可以提供的反應的量詳見說明書中的表。光譜特性:488-Azide:綠色熒光,Ex/Em=491/518nm;Hoechst 33342:藍色熒光,Ex/Em=346/460nm, bound to DNA。河南提供EdU細胞增殖檢測試劑盒評價EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發揮重要作用?上海東寰告訴您。
EdU細胞增殖檢測試劑盒BeyoClick? EdU細胞增殖檢測試劑盒(DAB法)(BeyoClick? EdU Cell Proliferation Kit with DAB),是一種基于DNA合成過程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類似物EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)的摻入,并通過隨后的點擊反應(Click reaction)使EdU被生物素(Biotin)所標記,然后加入的辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素(HRP-Streptavidin)與生物素結合,再然后通過DAB顯色,從而實現簡單、快速、高靈敏地檢測細胞增殖的試劑盒。
上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點是需要變性DNA后才能與抗體結合,導致了DNA雙鏈結構的破壞,影響了其他染料的結合染色,導致染色彌散,準確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優點:安全—–不使用[3H]thymidine,無放射性污染。簡單—–基于小分子化學反應的檢測方法,簡單高效,需三步:EdU孵育;細胞固定;熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒發揮的重要作用。
與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結果,而且小分子化學反應檢測方法反應快,效率高,反應時間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護細胞形態,更簡單、更靈敏、更快速、更準確。EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。EdU細胞增殖檢測試劑盒的功能具體介紹。上海哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒
EdU細胞增殖檢測試劑盒在社會上的重要性。湖南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢
細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測湖南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢
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